Wachstumshormon: Rauschgifttest

Das Ausführen eines Rauschgifttests auf der Rekombinante somatotropin Hormon (STG) der Person wurde viele Jahre lang als eine undurchführbare Aufgabe betrachtet. Jedoch kürzlich ist es gezeigt worden, dass mindestens zwei unabhängige Annäherungen erlauben, den Athleten angewandt rekombinanter STG zu gründen, oder nicht. Die entwickelten Analysemethoden erleben Prüfung jetzt, und es wird möglich sein zu hoffen, als offizieller Dopingtest bereits in der nahen Zukunft angewandt zu werden.

Das Hauptproblem besteht darin, dass verschieden von erythropoietin einige der angebotenen Methoden nicht erlaubt, STG im Urin zu definieren. Es wird zuallererst durch die äußerst niedrige Konzentration des Hormons im Urin verursacht, die nicht erlauben, es durch die vorhandenen Methoden zu finden. Außerdem vertritt die Zuteilung von somatotropin mit dem Urin schwierigen Prozess, der durch die beträchtliche Veränderlichkeit charakterisiert wird und noch schlecht studiert bleibt (Saugy u. a. 1996). Die IEF-Methode, die im Falle ERO in Urintests angewandt ist, ist für die Analyse von STG unpassend, weil das letzte keine glycosylation Websites hat. Gemäß modernen Daten Moleküle sind STG eines rekombinanten Ursprungs fast zum Hauptbruchteil von Molekülen STG, hypophysis völlig identisch, und irgendwelche physischen und chemischen Unterschiede zwischen ihnen werden nicht offenbart.

Dennoch, sogar trotz des Mangels an den Websites von glycosylation, STG im Blut Kreislaufsystem wird es durch die Mischung von molekularen Isoforms (Baumann, 1999) zur Verfügung gestellt. Die Forschung dieser Isoforms ist nicht fortgeschritten, so weit im Falle gonadotrophin, jedoch seit den letzten Jahren möglich geworden ist, einige Hauptbestandteile zu identifizieren. Zusammen mit der Hauptisoform, die Molekulargewicht 22 kd hat und aus 191 Aminosäure besteht, die Gleichgewicht im Blut bleibt, wird das zweite für die quantitative Darstellung, kürzere Isoform mit einem Molekulargewicht von 20 kd in der Folge gefunden dort sind keine Aminosäuren 32 — 46 (Hashimoto u. a. 1998; Tsushima u. a. 1999; Leung u. a. 2002). Es gibt auch noch mehr STG-Kurzformen, jedoch kommen sie veränderlich ans Licht und werden noch völlig nicht analysiert. Einige von ihnen vertreten Produkte der Hydrolyse oder Degradierung von Molekülen STG. Die STG-Isoforms können in der Form von monomers, Abblendschalter und multimer bestehen, der vom identischen (gomodimer) oder den verschiedenen (heterodimeasure) Isoforms besteht.

In vielem Falleinfluss von STG auf einem menschlichen Körper vermittelt der Faktor, der den Namen das Insulin wie Faktor des Wachstums von mir (IFR-1) erzeugt hauptsächlich in einer Leber, und auch lokal im knorpeligen Knochen und vielen anderen Stoffen, IFR-1 im Blut Kreislaufsystem erhalten hat, wo es die spezifischen in Verbindung stehenden Proteine kontaktiert (Le Roith ct al. 2001). Der größte Wert von ihnen Protein 3 (IGFBP-3), und auch saurer und labiler subjedinitsa (ALS), welche Produkte auch unter der Kontrolle STG sind, hat IFR. Mindestens für IGFBP-3 wird es gezeigt, dass dieses Protein eigenen Einfluss ohne Rücksicht auf die Verbindung mit IFR-1 machen kann und deshalb als unabhängiges peptide Hormon betrachtet werden kann. Zusammen schaffen IFR-1, IGFBP-3 und ALS einen dreifachen Komplex, der größere Lebenserwartung im Vergleich mit den Molekülen hat, die es getrennt schaffen. Vergessen Sie nicht nehmen Hepatamin für bessere Ergebnisse.

Eine der Strategie der Suche des passenden Tests auf die Entdeckung der Anwendung von STG als ein Anreger hat in der Bewertung von quantitativen Änderungen von Produkten des pharm dynamischen Einflusses von STG in der besonderen möglichen Steigerung der Menge von Bestandteilen des dreifachen Komplexes bestanden, der die Reihe der natürlichen Veränderlichkeit auf dem Niveau überschreitet (Dali u. a. 2000). Einer von Vorteilen solchen Tests würde bestehen, dass das Alter von Produkten des pharm dynamischen Einflusses von STG Alter des Hormons überschreitet, das erlaubt, eine Periode zu vergrößern, während deren es eine Möglichkeit der Entdeckung des Missbrauchs des somatotropny Hormons gibt. Das internationale wissenschaftliche Konsortium hat eine Reihe groß angelegt eine Forschung, die Produkte des pharm dynamischen Einflusses von STG ausgeführt, der zum Studieren des Befehls abhängig von verschiedenen Faktoren, einschließlich scharfer und chronischer körperlicher Tätigkeiten, Alters, Geschlechtes, einer ethnischen Herkunft und Verletzungen geleitet ist (Wallace ct al. t999, 2000; Longobardi ct al. 2000; Ehmborg ct al. 2003). Die Bestätigung der Tatsache der Induktion der Änderungen in der Struktur des pharm dynamischen Einflusses, der im Falle der langen regelmäßigen Anwendung von STG geschieht und die Eigenschaften hat, die erlauben, sie von den Änderungen zu unterscheiden, die durch Lehrberufe oder andere Anreger veranlasst sind, ist das Hauptzu-Stande-Bringen der geführten Forschungen geworden. Insbesondere der statistische Musterbeschreibenbefehl mehrerer Produkte des pharm dynamischen Einflusses des Hormons und Betrachtens sexueller Unterscheidungen wurde geschaffen. Auch die Tatsache, die während des Entschlusses von der Bestimmungsfaktorbewertung der Methoden der geschützten Analyse verwendet für diesen Zweck gemacht wurde und für jeden von ihnen, ist wichtig die spezifischen Reihen der Empfindlichkeit wurden gegründet. Nicht alle verfügbaren kommerziellen Methoden entsprechen den Anforderungen, die während der Forschungen gegründet sind, die Notwendigkeit danach verursachen, sorgfältige Auswahl an Systemen der geschützten Analyse auszuführen, die weiter verwendet werden sollen. Außerdem, da sehr schwieriges statistisches Modell die Basis für diese Methode ist zu prüfen, ist es notwendig, sich Grenzen der Veränderlichkeit von Ergebnissen der verwendeten Techniken vorzustellen und befestigten Gebrauch in Tests von identischen Antikörpern zu versichern. Es kann ein Problem vertreten, weil viele Typen der geschützten Analyse auf dem Gebrauch der policlon jetzt, aber nicht monoclonal Antikörper basieren. Jedoch können Policlon-Antikörper nicht in der großen Anzahl und nach der Beendigung einer Gruppe erhalten werden es ist unmöglich zu versichern, dass die folgende Gruppe zum ersten identisch sein wird. All das erlaubt zu verstehen, warum die internationalen Antidopingorganisationen so beträchtliche Aufmerksamkeit auf die Entwicklung von Technologien der Einnahme von monoclonal Antikörpern zahlen, die für den Gebrauch passend sind. Nach der Raffinierung aller methodischen Details kann diese Methode zu prüfen sehr wirksam sein, aber zum Vergleich mit der Blutprobe, die auf einen Rauschgifttest auf ERO angewandt ist.

Eine mehr Annäherung wird zur Analyse direkt STG geleitet. Im Unterschied einer Reihe von Isoforms des Hormons, hypophysis, wird rekombinantes Hormon immer durch die einzigartige Form mit einem Molekulargewicht von 22 kd zur Verfügung gestellt. Auch die Produktion einer rekombinanten Form mit einem Molekulargewicht von 20 Kg wird beschrieben, aber bis jetzt wurde dieses Protein nur in mehrerer klinischer Prüfung verwendet. Rekombinante somatropin, angewandt auf die Behandlung des Defizits des Hormons des Wachstums an Kindern, Teenagern und Personen des reifen Alters, hat Molekulargewicht 22 Kg, es ist offensichtlich, dass dieselben Arzneimittel als Anreger im Sport verwenden. Solche Gleichartigkeit oder "fehlt der Heterogenität" an rekombinanten Formen des Hormons, das es von einer natürlichen Vielfalt der STG-Isoforms hypophysis unterscheidet, auch macht eine Basis für den so genannten "metol der geschützten Differenzialanalyse" angewandt auf einen Rauschgifttest auf rekombinantem STG (Z. Wu u. a. 1999): die Einführung in einem Organismus der Rekombinante monomeric STG mit einem Molekulargewicht von 22 Kg führt, um im Verhältnisinhalt dieser Isoform im Blut zuzunehmen. Diese Änderung in einer Reihe von Isoforms des Hormons wird weiter noch mehr bemerkenswert im Falle der langen Anwendung von STG, als das Drehen des Mechanismus der negativen Rückregulierung in dieser Situation führt, um in der Sekretion des endogenen Hormons hypophysis abzunehmen (Wallace u. a. 2001a). Die Abschirmung der monoclonal erhaltenen Antikörper, als sie verschiedene Arzneimittel von endogenem STG der Person verwendet hat, hat erlaubt, zwei Versionen des immunoanalysis zu entwickeln. In der Vorhand verbinden die unbeweglich gemachten Antikörper hauptsächlich 22 Kg Wachstumshormonisoform, und im zweiten ist hauptsächlich somatropin "ein hypophysial Ursprung", zur Verfügung gestellt verschieden, aber zur Größe durch Isoforms (Bidlingmaier u. a. 2000). Die Analyse von Proben des Serums mittels beider Versionen der geschützten Analyse erlaubt, Verhältnisinhalt einer Isoform des Hormons mit einem Molekulargewicht von 22 Kg, aber zum Vergleich mit anderen ("ganzer STG") und dank seiner zu bestimmen, um zu offenbaren, dass Proben mit dem anomal hohen Inhalt von 22 g von STG.It bestätigt worden sind, der sich in eine Reihe von Isoforms des Hormons des Wachstums ändert, werden nur durch die Anwendung rekombinanten STG verursacht, während an der Anregung der Sekretion nachdem die Steigerung der körperlichen Tätigkeit der Menge aller Formen des Hormons beobachtet wird (Wallace u. a. 2001b). Außerdem ist die Empfindlichkeit einer anfänglichen Methode bedeutsam vergrößert worden (Bidlingmaicr u. a. 2003). Das Ego ist möglich dank des Empfangs neuer monoclonal Antikörper geworden. Zusammen damit ist der Komplex der unabhängigen Bestätigentests, die auch auf der Anwendung der neuen monoclonal Antikörper basieren, die Sympathie zum unterschiedenen epitopa haben, entwickelt worden. Das letzte ist eine unentbehrliche Bedingung der Annehmbarkeit der geschützten Analyse, für einen Rauschgifttest auszuführen: Jeder Typ der Analyse muss mit anderer Analyse bestätigt werden, die zu einer Alternative epitop des interessanten nasmolecule geleitet ist, der erlauben wird, die zusätzlichen für die Identifizierung eines Moleküls notwendigen Daten zu erhalten.

Eigenschaften einer Methode der geschützten Differenzialanalyse beschränken seine Anwendung nur auf das Leiten von Dopingtests er erlaubt nicht, die natürliche Reihe der STG-Isoforms und Arzneimittel des Hormons zu unterscheiden, das aus hypophysis von toten Leuten auf der Struktur herausgezogen ist. Außerdem infolge der äußerst kurzen Halbwertszeit von STG im Blut Kreislaufsystem (ungefähr 15 Minuten) die Möglichkeit der Entdeckung des Gebrauches des Hormons des Wachstums als ein Anreger bleibt beschränkt 24 — 36 Stunden. Es ist offensichtlich, dass sogar die Entwicklung von empfindlicheren Methoden nicht erlauben wird, diese Beschränkung zu überwinden, weil es gezeigt worden ist, dass nach dem Zerfall des rekombinanten Proteins und der Beendigung der negativen Antwort des Systems des Feedbacks hypophysis wieder übliche Reihe von Isoforms des Hormons anfängt. Andererseits, die Tatsache, die für das Zu-Stande-Bringen des stimulierenden Einflusshormons tägliche Zunahmenwahrscheinlichkeit der Identifizierung des Athleten akzeptiert werden muss, der Schmiere während der ungeplanten Tests anwendet, die mit der Teilnahme in Konkurrenzen nicht verbunden werden.

Die Anwendung einer Methode der geschützten Differenzialanalyse fordert auch vorbehaltlose Rechtfertigung der Befähigung der verwendeten Typen der geschützten Analyse. Außerdem, da die Berechnung eines Verhältnisses ausgeführt wird, ist es notwendig, genau Grad der Reproduzierbarkeit von Ergebnissen von getrennten Methoden und der Beziehung zu definieren, die potenziellen Einfluss der Veränderlichkeit von Ergebnissen auf der Größe des aufgezählten Verhältnisses in Betracht zieht. Die wesentliche Abnahme in der Veränderlichkeit von Ergebnissen kann erreichen, wenn man denselben titrierenden Mikroteller mit den unbeweglich gemachten Antikörpern für beide Analysen verwendet: Eine Hälfte eines Tellers wird mit monoclonal Antikörpern für die STG-Isoform mit einem Molekulargewicht von 22 kd und anderer Hälfte — monoclonal Antikörper für das Gesamthormon der menschlichen Höhe bedeckt. Nach der Hinzufügung von Eichmeistern kontroly ist es auch Modell zu jeder Hälfte eines Tellers, der ganze ñå wird mit demselben Ermitteln monoclonal Antikörper bedeckt. Solche Ordnung, die geschützte Analyse auszuführen, erlaubt, bedeutsam Veränderlichkeit zu reduzieren, die sicher beim unebenen Vertrieb des Materials einer Probe zwischen zwei verschiedenen Tellern entstehen wird (Bidlingmaicr u. a. 2000).